期刊简介
本刊主要刊载皮肤病与性病学科的专业文章，促进我国医药卫生事业发展。读者对象：县及县以上医院皮肤科学专业医师，与皮肤科相关的学科人员。
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首页>临床皮肤科杂志
- 杂志名称：临床皮肤科杂志
- 主管单位：江苏省卫生厅
- 主办单位：江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院）
- 国际刊号：1000-4963
- 国内刊号：32-1202/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：农业与生物科学研究中心文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 医学文摘
抗人毛乳头细胞造血干细胞016基因多克隆抗体的制备
邹锋；郝飞；宋志强；易勇；翟志芳；邹全明；叶庆佾
关键词：人毛乳头细胞, 造血干细胞016基因, 原核表达, 抗体, 兔
摘要：目的:在大肠杆菌中重组表达人毛乳头细胞造血干细胞(HSPC)016基因功能序列,制备特异性多克隆抗体.方法:采用PCR技术从pcDNA3.1(+)/HSPC 016中扩增出目的基因克隆至pMD18-T载体,酶切回收目的片段连接至表达载体pET-28a(+).重组质粒经酶切及测序鉴定后转化工程菌E.coliBL21,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对目的蛋白N-端氨基酸测序鉴定后免疫日本大耳白兔,制备兔抗HSPC016多抗血清,以双向免疫扩散、ELISA、Western blotting检测抗体效价及特异性.结果:在大肠杆菌中高效表达了相对分子质量约7 200的HSPC 016蛋白,目的蛋白N-端氨基酸测序结果与预期序列完全一致.双向免疫扩散显示兔抗HSPC 016多克隆抗体效价为1:16;ELISA分析兔抗HSPC 016血清的滴度可达320 000 EU;Western blotting显示抗血清可与原核表达的HSPC 016蛋白特异结合.结论:成功制备了兔抗HSPC 016多抗血清,为进一步研究HSPC 016蛋白的结构与生物学意义奠定了基础.
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